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2020年1月15日水曜日

【実験】NFκB p65 の核内移動（translocation）を IFA で評価するプロトコール

　実験プロトコールを作るのが好きです。
　今回は最近よくやっていた実験のプロトコールを紹介します。

Fibroblast において NFκB p65 の核内移動（translocation）を Immunofluorescence Assay (IFA)で評価するプロトコール (protocol)

プロトコールの実際

　1. Seed cells on glass cover slip (1×10^4 ~ 1×10^5) and incubate O/N.
　　　(Electron Microscopy Sciences Cat: #72196-12) in 24-well plate.
　2. Starve cells with FBS-free media, 1hr.
　3. Stimulation cells with 50 ng/ml of TNFa for 30-40 min.
　　　(diluted in 200µl of FBS-free media).
　4. Wash twice with ice-cold PBS.
　5. Fix with Cytofix/CytopermTM (BD Cat:51-2090KZ), 20min., RT.
　6. 1st Ab in Perm/washTM buffer (BD Cat:51-2091KZ), 1hr, RT, shaking.
　　　anti-p65 antibody (CST NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb #8242), 1/500.
　7. Wash with Perm/wash buffer
　8. 2nd Ab in Perm/wash buffer, 30min., RT, shaking in dark.
　　　anti-Rabbit goat antibody-Alexa fluor488 (invitrogen), 1/500.
　9. Wash with Perm/wash buffer, twice
　10. DAPI staining in PBS, 1min, RT.
　11. Wash twice with PBS.
　12. Enclose on Fisherbrand Superfrost (Cat 12-550-15)
　　　with Fluoromount-G (SouthernBiotech Cat: 0100-01)

観察と評価

　観察は蛍光顕微鏡で行う。評価については、Alexa488 で染まった p65 が核内（DAPIとマージ可能な領域）に移っている細胞数を計測する。

注意点

　
　難しい実験ではありませんが、細胞腫によってはガラスから剥がれることがあります。また、染色と洗浄はしっかりと行わないと染めむらが生じることがあります。

2020年1月14日火曜日

【書籍紹介】名画と読むイエス・キリストの物語

　すばらしい書き手である中野京子さんの一冊、名画と読むイエス・キリストの物語を紹介したいと思います。

　【書名】名画と読むイエス・キリストの物語

　【著者】中野京子
　【出版社】大和書房
　【リンク】楽天ブックス　 Amazon　e-hon
　　　　　　honto　7net　紀伊國屋書店　図書館

　中野京子さんはドイツ文学の人、としてだけでなく「怖い絵」シリーズでも有名な、絵画にも非常に詳しく、かつ、読みやすく理解しやすい文をかかれる素晴らしい書き手であると思います。

　本書は、イエス・キリストを題材に描かれた絵画を通して、イエスの生涯を追っていった物語になります。とにかくイエス・キリストの生涯について非常にわかりやすくまとまった読みやすい文で、キリストの生涯を知りたい人にはよい入門書ですね。

　名画についてはどれも扱いが小さく、画を楽しむ本というよりは、そういう画をしるというのによい本であると思います。

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2020年1月13日月曜日

【書籍紹介】最適な実験を行うためのバイオ実験の原理

　バイオ実験についてわかりやすい初学者向けの入門書を紹介します。

　【書名】最適な実験を行うためのバイオ実験の原理
　―分子生物学的・化学的・物理的原理にもとづいたバイオ実験の実践的な考え方

　本書は分子生物学的、化学的、物理的な原理から、しっかりとバイオ実験について解説してある初学者向けを銘打った一冊です。

　非常にわかりやすく丁寧に原理から解説されており、バイオ実験においてなにをどのようにどうやって行っているのかが分かるようになっています。
　図もわかりやすく、理解を助けてくれます。

　初学者むけと書かれているものの、中級者以降でもなるほどね、と思うところは多いと思いますし、教えるときにも役に立つことがたくさん載っていると言えます。

　バイオ実験を始める人、学生さん、そして指導者にぜひ読んでいただきたい一冊です。

　

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2020年1月12日日曜日

楽天 ROOM を始めてみました

　楽天市場のショッピングSNS である楽天ROOM をはじめてみました。
　不覚にもこのサービスつい最近まで知りませんでした…。

　このSNSは楽天が運営しているもので、楽天市場と連携しており、楽天市場にある商品にコメントを付けてコレ、と投稿すると共有できるというもの。

　紹介した商品を ROOM 経由で買ってもらうとポイントが紹介者に入るようになっているんですね。SNS的な機能と、アフィリエイトの機能を兼ねていて面白そうです。

　このブログで紹介したものなども ROOM にもまとめていきたいと思います。
　

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2020年1月11日土曜日

【書籍紹介】バイオ実験の知恵袋―効率アップとピンチ脱出のワザ350

　バイオ実験についてちょっとしたことを知りたい、ちょっと作業上でアイデアがほしい、というときによい一冊、バイオ実験の知恵袋

を紹介いたします。

　【書名】バイオ実験の知恵袋

　【著者】小笠原道生
　【出版社】羊土社
　【リンク】楽天ブックス　 Amazon　e-hon　honto
　　　　　　7net　紀伊國屋書店　図書館

　
　本書は、どちらかというと初心者がバイオ実験で躓きやすいところや、アイデアを盛りこんだ本なのですが、実験になれている人のほうがより、の本から得られるアイデアは結構役に立つことが多いと思います。

　もともとは羊土社の実験医学の連載にあったものですが、とにかく、裏技的なものも多くのっているのがとても良いのですね。あぁ、こんな方法をとれば効率がよくなるのか、こんな楽する方法が、ということが結構たくさん書かれていてよいのです。
　
　超初心者はしっかりと入門書から読んだ方がよいと思うので、本書から突然入るのはどうかと思いますが、ちょっとできるようになった中級者から、初心者を指導するようになる上級者がよむとより効果的であると思います。

　身近なバイオ実験のちょっとした躓きだけでなく、効率を求めてみたい人にはぜひ一読をお勧めしたいと思います。

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2020年1月10日金曜日

【書籍紹介】病理診断を極める 60のクルー

　病理医向けの書籍、病理診断を極める 60のクルーを紹介します。
　専門医受験前の方や、専門医でもちょっとした事項をまとめて読んでおきたい方にはおすすめできる一冊です。

　【書名】病理診断を極める60のクルー

　【著者】清水道生

　【出版社】金芳堂

　【リンク】楽天ブックス

　Amazon　e-hon　honto

　　　　　　7net　紀伊國屋書店　図書館

　多数の著書のある清水先生の一冊。
　この本は、ひろい分野の病理診断において、ちょっとしたクルーを元にスムーズに診断ができるようになるよ、というアトラス本です。

　アトラス形式でこの診断はなに？などのようなページがまずあり、それの解答と、解説、そしてクルーは何であるかがまとまっています。重要なまとめ事項も別にまとめられており、記憶法などのノウハウも結構かかれていて大変に良いですね。

　写真はきれいで、分野も広く、読みやすく、すぐに全部読み通せると思いますが、特にまとめの部分はいつでも取り出せるようにしておくととても便利であると思います。

　病理診断を始めたばかりの若い先生や、専門医試験のためのちょっとした復習用などによいように思います。
　こういう読みやすい診断関連の本がもっと増えるとよいなと思いました。

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2020年1月9日木曜日

【書籍紹介】最後の診断

　病理医が主人公の不朽の名作、残念ながら邦訳本は絶版ですが、これはおすすめ、という一冊です。

【書名】最後の診断 (新潮文庫ヘ 4-3)
【著者】アーサー・ヘイリー
【訳者】永井淳

　原著は kindle で読めます:
　　　▶ The Final Diagnosis

内容説明より引用

すべての治療の基礎になる病理部門を牛耳る頑迷な老医師ピアスンの存在は、スリー・カウンテイズ病院の機能を著しく停滞させていた。やがて、Rhマイナスの妊婦と骨肉腫の疑いがある看護学生に対する彼の診断をめぐり重大事態がもちあがった。「ホテル」「大空港」「自動車」など、現代の巨大組織の内面に視線を向ける著者が、総合病院に展開される生と死の迫真ドラマを描写する。

病理医が主人公の名作小説

　この小説は、病理医が主人公の名作小説です。

　舞台はアメリカの病院で、様々な医療についての出来事が展開していくのですが、中心にいるのは一人のベテラン病理医ジョー・ピアスン。

　このジョー・ピアスン様々な面で問題を抱えており、病院の機能を停滞させていることが描かれます。そして若手との確執なども。
　そしてアーサー・ヘイリーのすばらしさ、人物のセリフが本当によく練られていて、人間がよく描かれています。

　病院の中でのさまざまな力関係、診断の難しさ、人間関係、そして恋愛などなど、本当によく観察検討されて描かれていきます。時代は下れどいまでもこれはどこでも通じるなぁという描写がとても多く、うならせられます。

　そして、メインとなるストーリーにおいて、症例についてピアスンは骨肉腫と診断、一方の若手コールマンは良性であると診断。紆余曲折あってピアスンが責任を取る形で骨肉腫の診断となるのですが…この展開にも病理診断の実際が反映されていて息を飲む展開です。

　1959年に書かれたとは思えない、今でもビビットに通じるテーマ。本書は病理医を主人公に据えた小説として一番の名作であると思います。

　古い本なので活字が小さく細かくちょっと読みづらいかと思います。翻訳もやや古い。原著で読むのもおすすめですし、できれば復刊してほしいですね。
　
　おすすめ度： ★★★★★

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2020年1月8日水曜日

【サイト紹介】Rakuten Rebates というサービスをご存知ですか？

　Rakuten Rebates というサービスをご存知ですか？

ポイントサイトです

　このサービスはいわゆるポイントサイトなのです。
　ポイントサイトを今までいくつか紹介してきました。

　▶ ポイントサイト紹介① ポイントタウン
　▶ ポイントサイト紹介② ハピタス
　▶ ポイントサイト紹介③ ECナビ

　これらのポイントサイトは、ポイントサイト経由で買い物やサービス利用をすると、それに応じて独自のポイントが手に入る、というものです。
　実質、サービスや商品を割引で購入できるわけで、ネットで買い物をする人にはポイントサイトを利用しない手はありません。絶対にお得であり、使用すべきと強くお勧めできます。　

　紹介しているサイトはどこもお勧めで私も愛用しているのですが、今回紹介するサイトである Rakuten Rebates は、楽天が運営しているポイントサイトであり楽天ポイントがポイントとして得られるという特徴があります。

取扱いサービスの広さ

　とりあつかっているサービスも、楽天系のサービスはもちろんのことながら、Johshin などの家電系、Bookoff や HopnyaClub などの書籍系、NEC Direct やVAIO などのパソコン直売ショップ、JALなどの旅行関係、ユニクロ・GUなどのファッション関係、ドミノ・ピザなどの出前関係、Apple store、iTunes store も入っているとても範囲の広いものです。

還元率のよさ

　ポイント還元率も良好で、5％や7.5％などの大きなバックのお店が多くあります。
　これは他のポイントサイトと比べても遜色ないどころか、有利なことも多いのです。かつ、他のポイントサイトであれば、溜めたポイントを交換する際に手数料がかかったりすることもありますが、楽天ポイントとして使用するのであれば、Rakuten Rebates はそのままポイントが楽天ポイントで溜まりますので、お買い物に使えます！

登録も簡単

　楽天を使っている方なら登録は簡単で、楽天アカウントで入るだけ。
　楽天アカウントをお持ちでない方もメールアドレスさえあればすぐにアカウントが作れます。

頻繁に行われるキャンペーンにも注目

　ポイントアップのキャンペーンなども頻繁に行われています。
　サービスや商品購入の際に、最初にこのサイトをチェックしておくのは一考です。実質数％の割引で買えるわけですから、うまく利用するのが一番！
　

　生活防衛に使えるポイントサイトとして一押しです！
　Rakuten Rebates ぜひ使ってみてください。

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